免疫分析法是利用目标分子和抗原竞争并与抗体结合的原理。检测真菌毒素的一种方法。常采用与荧光标记相结合的策略追踪目标物。常见的免疫分析法包括酶联免疫分析法(ELISA)、免疫亲和柱-荧光光度法和胶体金免疫分析法等。

因为抗体-抗原的特异性结合具有较高的亲和性，免疫分析法一般都具有专一性高、特异性强的优点，酶联免疫法和侧流试纸条法在ZEN检测方面应用十分广泛。ELISA分析法在实际应用中常被制成试剂盒，操作简单、灵敏度高。胶体金免疫层析法也具有检测速度快、检测限低的优点。但是，抗体和抗原制备较困难且不易保存，成本高、重复性差等缺点常限制其应用。该方法以高度分散的MNPs为载体固定抗体，基于MNP的免疫吸附剂与大体积样品中游离的ZEN相互作用。并将其转移到较小体积(分析物的初始浓度)，然后与ZEN-光氧化物酶复合物结合；未反应组分中的MNP-抗体-ZEN/ZEN-辣根过氧化物酶(HRP)复合物经过磁性分离后。体系中再加入化学发光底物与HRP反应。进行测定。该方法对ZEN的检测限达4pg/mL。但由于抗体的加入使成本较高，不易控制。且实际检测中可能出现重复性差、假阳性率高等情况，样品中的氧化酶、蛋白酶等也可能对检测结果造成影响。为获得更稳定的检测方法，Duan等以QBs作为新型荧光探针。其荧光强度约为相应QDs的2800倍。首先采用微乳液法制备有机可溶性CdSe/ZnSQDs胶囊，获得强荧光QBs；接下来合成QB-mAbs探针，并将样品与探针预混合，加入样品垫；QB-mAbs与ZEN的免疫复合物同IgG发生反应，在检测线(T线)上形成荧光带；多余的QB-mAbs被控制线(C线)捕获结合，在C线上形成荧光带，样品中ZEN含量越多。测试线上荧光强度越低。得到ZEN的线性范围为0.125～10ng/mL，检测限为0.0625ng/mL。

与光度法相比。荧光分析法通过监测体系荧光信号前后变化对结果进行测定，灵敏度较高，可检测微量或超微量样品。

相关链接：辣根过氧化物酶，氧化酶，蛋白酶