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以可见光作为光源,比较溶液颜色深浅度以测定所含有色物质浓度的方法为比色法。分光光度法是比色法的一种,它是通过测定吸光度的方式来进行“比色”的,采用分光光度法测定甲醇的原理是先将甲醇氧化为甲醛,甲醛与显色剂反应显色后进行光度法测定。使用的氧化剂主要是高锰酸钾,显色剂包括亚硫酸品红、变色酸和1,2-萘醌-4-磺酸钠等。
甲醇在磷酸溶液中被高锰酸钾氧化成甲醛,过量的高锰酸钾被草酸还原,所生成的甲醛与亚硫酸品红反应,生成醌式结构的蓝紫色化合物,最大吸收波长为590nm,其颜色深浅与甲醇的含量成正比。甲醇质量浓度在0~230mg/L范围内具有较好的线性关系,相关系数为0.99759。该方法已用于白酒、啤酒、五味子酒、花露水、碘酊等商品中甲醇的检测。
在磷酸溶液中,甲醇被高锰酸钾氧化生成甲醛,过量的高锰酸钾用亚硫酸钠或偏重亚硫酸钠除去。在浓硫酸存在下,甲醛与变色酸反应,生成对醌结构的蓝紫色化合物,最大吸收波长为575nm。丁烨等采用变色酸光度法测定汽车风窗玻璃清洗液中的甲醇含量,甲醇质量浓度在100~2500mg/L时。线性关系良好,相关系数为0.9993,测定结果的相对标准偏差为0.52%,加标回收率为93.20%~103.67%;练有南等等研究并优化了上述方法,包括吸收波长、磷酸与硫酸对高锰酸钾反应的影响、变色酸用量、沸水浴时间等,硫酸使用体积为4.0mL,高锰酸钾使用体积为0.4mL,变色酸的量为0.5mL,沸水浴20min、检测波长为575nm时吸光度最大,甲醇含量在0.005~0.12g/L范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.994。
pH13的KCl-NaOH缓冲溶液中,以甲醇电离的甲氧根离子(CH3O-)为催化剂,催化氢氧根离子与1,2-萘醌-4-磺酸钠反应,形成橙红色的2-羟基-1,4-萘醌,最大吸收波长454nm,据此进行定量分析,该法操作简便、灵敏度高。蒋小良等研究了该法的测定条件,包括吸收波长、pH值、显色剂和缓冲溶液的用量、稳定时间和干扰试验等。甲醇质量浓度在40~2000mg/L范围内与吸光度线性关系良好,相关系数为0.9993,检出限为25mg/L。
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