北方伟业计量集团有限公司
PCR技术虽是一种快速、特异、灵敏、简便、高效的检测新技术，但其广泛运用会受限于：
①操作过程中样品间的交叉污染和极少量外源性DNA的污染，都会对检测结果产生很大影响；
②从各种食品原料中高效率的DNA抽提方法有待于开发；
③活菌和死菌不能区别；
④容易受到食品基质、培养基成分的干扰，残留食物成分会抑制PCR酶反应；
⑤引物的设计及PCR反应条件是影响特异性和敏感性的重要因素。
在实际应用中也存在不少问题，污染问题就是其中之一。由于PCR是一种极为灵敏的反应，一旦有极少量外源性DNA污染，就可能出现假阳性结果；此外，各种实验条件控制不当，很容易导致产物突变；还有，引物的设计及靶序列的选择不当等都可能降低其灵敏度和特异性。因而，实验室操作的规范化在PCR技术中是极其重要的。但由于其快速、特异、敏感的特点，PCR技术作为一种检测手段仍有巨大的运用价值。而且随着研究不断深入，PCR检测方法也会得以发展和改善，并将在食品微生物检测中得到更多的应用。
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