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比色法是通过溶液对光选择性吸收后产生的可视化颜色测定组分含量的检测方法。颜色的变化通常由结构的改变、酶催化底物、纳米材料的催化氧化、纳米粒子的聚集或分散等引起。Yu等建立了一种基于适配体和光催化比色的金黄色葡萄球菌检测方法。dsDNA-SYBRGreenI络合物在光辐照下催化3,3',5,5'-四甲基联苯胺的氧化,从而产生对金黄色葡萄球菌的光催化比色反应。Raji等开发了一种基于适配体传感器比色检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的棉拭子,通过棉拭子显色就可以判断金黄色葡萄球菌的存在与否,只需5min,不仅如此,还可以通过颜色比对实现对金黄色葡萄球菌的定量检测。检出限和定量限的理论值为2CFU/mL和5CFU/mL。Fan等建立了基于适配体与纳米材料催化比色的检测方法。首先,针对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的重要标记蛋白PBP2a进行适配体筛选;再基于该适配体和GO/Au可开关的过氧化物酶活性设计比色法生物传感器,对于PBP2a的检出限低至20nmol/L。除了酶反应等比色之外,金纳米粒子是一类经典的纳米材料,其优势在于具有较高的消光系数,分散状态呈现紫色,聚集状态呈现蓝色,而且具有易于合成、光学性能良好以及生物相容性较高等特性,因此也常被用于比色法的检测。Yao等将IgYFe3O4/Au作为捕获探针,Apt-AuNPs作为信号放大元件,基于金纳米粒子的类过氧化物酶催化活性的增强和TMB/H2O2报告系统的蚀刻,检测上清液中未结合的AuNPs,肉眼即可观察到颜色的变化,该方法的检出限为10CFU/mL。与荧光检测方法、电化学检测方法等其他方法相比,比色法观察更为直观、操作方便简单、成本低廉。而且,比色法检测快速、对人员操作要求较低、无需昂贵的分析仪器,因此,其应用于现场检测具有较大潜力。
相关链接:金黄色葡萄球菌,甲氧西林,3,3',5,5'-四甲基联苯胺
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