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清香型白酒酿造微生物鉴定的研究

周世红-会员头像-m.cellulartx.com伟业计量
周世红 2021-08-30 16:54 评论( 0 ) 浏览( 730 )

中国酿酒史传承久远,对于酿造过程中微生物的认识与研究一直是研究热点。平板纯培养法是将微生物进行分离纯化培养,观察显微镜下形态,并根据生理生化特征进行鉴定,其适用于可培养的微生物,而发酵环境中绝大部分是未培养微生物,因此无法真正了解微生态的整体,无法分析微生物菌群间的相互作用。随着生物技术的发展,磷脂肪酸分析方法(phospholipidfattyacid,PLFA)、基于聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)的指纹图谱分析、基因测序及系统发育分析、克隆文库、荧光原位杂交技术(fluorescenceinsituhybridization,FISH)、宏基因组学、蛋白组学、代谢组学等研究方法的出现,大力推动了白酒微生态学的发展。

PLFA广泛用于研究微生物复杂的群落关系及其动态变化规律。不同微生物种属的PFLA结构及种类有一定的异同,所以可作为微生物标记物不仅能应用于研究微生物的群落结构,也可用于微生物菌株的辅助鉴定。基于PCR的指纹图谱分析技术是目前白酒酿造微生物中常用的技术,是通过比较脱氧核糖核酸(deoxyribonucleicacid,DNA)指纹图谱中的条带剖析样品中微生物的群落组成以及多样性,包括变性梯度凝胶电泳(denaturinggradientgelelectrophoresis,DGGE)、单链构象多态性(singlestrandconformationpolymorphism,SSCP)、限制性片段长度多态性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)等,其中最常用的是PCR-DGGE技术。高通量测序(high-throughputsequencing,HTS)又称为“下一代”测序技术(next-generationsequencingtechnology,NGS),该技术一次最多能并行测定几百万条DNA分子序列,并且读长较短,能够深入、细致、全貌的分析一个物种的转录组和基因组,常用的测序平台有Solexa、SOLiD和454等。基因文库是对目标样品中微生物建立基因文库,通过测定文库中的基因序列,进而得到样品中所含微生物的基因种类和相对数量,其中最常用的是细菌16SrDNA基因克隆文库、真菌18SrDNA基因克隆文库以及真菌内转录间隔区(internaltranscribedspacer,ITS)基因克隆文库。

相关链接:脂肪酸脱氧核糖核酸白酒

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