邀好友领红包

北方伟业计量集团有限公司

  • 
/标准样品生产认可证书
  • CNAS实验室认可证书
  • 
定级证书
  • 豫南检测资质认定证书
  • 质量管理体系认证证书
  • 伟业计量高企认证证书
  • 中国计量测试学会合作单位

组织蛋白提取法

纷繁-会员头像-m.cellulartx.com伟业计量
纷繁 2019-06-18 21:03 评论( 0 ) 浏览( 1138 )

组织蛋白提取法

1.PBS灌注小鼠,取脑,每个1.5ml的EP管装半只脑,先放在干冰上,然后-80℃保存;

2.取出脑组织,称重,用RIPA buffer在冰上洗1次,按照每100mg加1ml RIPA buffer(+100× PMSF+100× PIC)的比例,加入相应体积的RIPA buffer(一般大脑为200mg,故一般加入2ml RIPA buffer);

3.在5ml tube管中剪碎脑组织,放在冰上,用电动匀浆器匀浆,避免起泡沫和发热,(可选步骤:将得到的匀浆液用液氮反复冻融3次), 各组织裂解时间要一致,冰上放置30min;

4.将5ml tube管中的裂解液分装到两个1.5ml的EP管中,4℃,12000 rpm离心30min;

5.每管取上清600ul,两管混合在一起(1.2ml),轻轻颠倒混匀后,分装为每管300ul,共四管,-80°保存;


点赞图片
  • 暂无回复...

登录后才可以评论

立即登录
发表评论
楼主动态
相关推荐
推荐标物
请告知您的电话号码,我们将立即回电

通话对您免费,请放心接听

温馨提示:

1.手机直接输入,座机前请加区号 如13803766220,010-58103678

2.我们将根据您提供的电话号码,立即回电,请注意接听

3.因为您是被叫方,通话对您免费,请放心接听

请设置您的密码:
分享到微信
Baidu
map