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如何确定荧光激发谱和荧光发射谱

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纷繁 2019-05-09 20:17 评论( 0 ) 浏览( 1467 )

如何确定荧光激发谱和荧光发射谱

先将仪器的激发波长设为一个固定值,如200nm,然后进行发射波长扫描,范围暂设为210-800nm,记录峰值波长;改变激发波长后重复上述操作,确定峰值波长。两次扫描相同的波长即为该物质荧光峰。荧光峰的位置是不随激发波长的改变而改变的,仅是峰高(或峰面积)发生改变。

将上述确定的波长作为发射波长,再进行激发波长的扫描,激发波长的范围要小于发射波长(根据斯拖克斯定律);若仅有一个峰即为激发波长,再将这个波长固定下来重新做真正的发射波长扫描,可以得到良好的信噪比的结果值;若激发波长扫描后出现多个峰,则根据激发和发射呈镜象的特点来确定激发波长。


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