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重组蛋白的保存和使用

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小璐 2020-11-17 08:51 评论( 0 ) 浏览( 1954 )

1-离心:开盖前离心试剂管,可以选用快速离心10000-12000rpmx30s 或者3000-3500rpmx5min,效果良好。冻干粉在运输过程中可能会因颠簸而漂散并粘贴于管壁或管盖上,所以在打开塑料瓶盖前,需将冻干粉通过离心收集到管底,以便用很小体积的液体即可将冻干粉完全溶解。

2-重悬:用推荐的稀释液稀释并重悬至0.1-1.0mg/ml,不可振荡。这个步骤即为溶解步骤,非常重要。需要用推荐的稀释液重悬,并确保重悬液到指定的浓度范围,不可以进行涡旋振荡。

3-短期保存:该重悬液在2-8℃最长可保存1周,用于短期实验,方便实验取用。

4-长期保存:如果实验周期长于一周,或配制的重组蛋白一次用不完,需对其进行长期保存。方法是:将已重悬的细胞因子或蛋白用含载体蛋白,如0.1%BSA或者10%FBS或者5%HSA或者5%海藻糖的的溶液将重悬液进一步稀释,然后分装冻存于-20℃至-80℃。

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