新型冠状病毒核衣壳蛋白溶液

Nucleocapsid Protein Solution Reference Material of Corona Virus Disease 2019 (2019-nCoV)

    新型冠状病毒核衣壳蛋白溶液 作为测量标准，用于新型冠状病毒核衣壳蛋白抗原免疫法检测 的量值溯源、测量方法验证评价以及实验室质量控制。

一、样品制备

    本 是以公布的 NCBI GenBank 中新型冠状病毒 N 基因（28274-29533 位）为依据，构建包含 N 蛋白全长的质粒，由大肠杆菌重组表达得到 2019-nCoV 核衣壳重组蛋白，经进一步纯化后得到核衣壳 蛋白 候选物原料，采用 PBS 缓冲溶液按照比例稀释后进行分装和定值。

二、溯源性及定值方法

    采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、凝胶排阻液相和反相液相色谱进行纯度分析，采用基质辅助 激光解析串联飞行时间质谱（MALDI-TOF）进行酶切鉴定，基于氨基酸分析的同位素稀释质谱方法对缓冲 溶液中核衣壳蛋白的质量浓度进行测定，作为 的标准值。同位素稀释质谱法是国际公认的潜在基 准测量方法，通过开展方法确认，以 GBW09237 L-亮氨酸纯度和 GBW09235 L-苯丙氨酸纯度国家一级标 准物质为量值溯源参考标准，并使用经检定/校准的称量等计量器具，确保本 的量值溯源至 SI 基 本单位千克（kg）和摩尔（mol）。

三、特性量值及不确定度

    所赋特性量值的不确定度由定值测量、均匀性和稳定性引入的不确定度分量合成得到。本 密 度为 1.021 g/cm3（t =18°C）,可据此进行体积浓度的换算。

四、均匀性及稳定性评估

    参照 JJF1343 国家计量技术规范（等效 ISO 指南 35），采用同位素稀释质谱方法对该 进行均 匀性研究，结果表明均匀性良好，最小取样量为 15 μL。采用同位素稀释质谱和高效液相方法对该 进行了初步稳定性研究，参考同类 的稳定性数据，有效期暂定至 2020 年 4 月 13 日，研制单位 将继续跟踪监测该 的稳定性，有效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、包装、贮存及使用

    1.包装规格：本 采用 0.5mL 带盖冻存管包装，每管 150 μL。

    2.保存和运输条件：置于-70℃冰箱中保存。采用干冰运输，收到 后应检查 是否处于 冰冻状态。检查无误才可用于实验。

    3.使用注意事项：本 在 4°C 环境可稳定 1 天，在室温和 60°C 环境下不稳定，复融后一次使用， 不可反复冻融。使用时 复溶后应在冰水浴中进行稀释操作，稀释完成后立即上机测定，常温下的 操作时间不要超过 2.5 小时。对本 进行梯度稀释时，推荐使用 PBS 缓冲溶液作为稀释剂。

六、合作者   

    由广东省实验动物监测所（广东省实验动物重点实验室）为本 研制提供构建好的表达菌株，南京金斯瑞生物科技公司完成蛋白质表达和纯化。

声明

1．本 仅供实验室研究与分析测试工作使用。因用户使用或储存不当所引起的投诉，不予承担责任。

2．收到后请立即核对品种、数量和包装，相关赔偿只限于 本身，不涉及其他任何损失。

3．仅对加盖“中国计量科学研究院 专用章”的完整证书负责。请妥善保管此证书。

4．如需获得更多与应用有关的信息，请与技术咨询部门联系。

注：以上信息仅供参考，以产品附带证书为准。