2 结果与分析

2.1 的均匀性

随机抽取11个单元的大肠杆菌 进行均匀性评估，见表1。

使用PCA培养基进行测定时，F=0.67，小于查表值F0.05(10,22），其均匀性引入的相对标准不确定度urel(bb)=2.9%。使用VRBA培养基进行测定时，F=1.84，小于查表值F0.05(10,22），其均匀性引入的相对标准不确定度urel(bb)=3.3%。说明 在组内不存在显著性差异，其均匀性良好。

2.2 的稳定性

根据表2的短期稳定性评估结果，基于PCA培养基和VRBA培养基进行测定，大肠杆菌 可以在–20℃和4℃稳定保存7天。根据表3的长期稳定性评估结果，基于PCA培养基和VRBA培养基进行测定，其可以在–20℃稳定保存6个月。因此，该 建议在–20℃的条件下储存，运输时建议使用干冰。

使用PCA培养基测定时 长期稳定性引入的相对标准不确定度urel(s)=6.0%；使用VRBA培养基测定时 长期稳定性引入的相对标准不确定度urel(s)=5.9%。

2.3 的定值

经由6家实验室合作定值，每家实验室分别使用PCA和VRBA培养基进行测定。结果见表4，测量结果经科克伦法检验为等精度，经Grubbs和Dixon法检验未发现异常值，经夏皮洛-威尔克法检验呈正态分布。使用PCA培养基测定时，大肠杆菌 的标准值为7.1×103 CFU/g,A类相对标准不确定度urel(A)=1.7%；使用VRBA培养基测定时，大肠杆菌 的标准值为6.1×103CFU/g,A类相对标准不确定度urel(A)=2.0%。

2.4 定值结果的不确定度评定

大肠杆菌 的不确定度由4部分组成：第1部分是A类相对标准不确定度urel(A)，来源于合作定值过程；第2部分是B类相对标准不确定度urel(B)，包括天平、移液器、稀释因子带来的不确定度；第3部分是 均匀性引入的相对标准不确定度urel(bb)；第4部分是 长期稳定性引入的相对标准不确定度urel(s)。将这4部分相对标准不确定度合成后计算得到标准值的合成相对不确定度urel(C)，及扩展不确定度U(k=2，置信概率95%）。结果（表5）表明，大肠杆菌 基于PCA培养基的标准值为(7.1±1.1)×103 CFU/g，基于VRBA培养基的标准值为(6.1±1.0)×103 CFU/g。因此，本研究成功研制出具有2种特性量值的大肠杆菌 。

2.5 不同品牌PCA培养基和VRBA培养基的生长率

使用 法，对5个品牌PCA培养基和VRBA培养基的生长率进行评价。结果如表6所示，待测PCA培养基的生长率均满足PR≥0.84的要求，待测VRBA培养基的生长率均满足PR≥0.83的要求，且PCA培养基和VRBA培养基的评价结果和国标方法的评价结果有很好的相关性。该 可以同时用于PCA培养基和VRBA培养基生长率的评价。

3 结束语

本研究尝试提出了一种新的微生物 研制思路，即使用多种培养基研制具有多种特性量值的 ，并且研制出具有两种特性量值的大肠杆菌 。研制过程中同时使用PCA培养基和VRBA培养基进行均匀性和稳定性评估及多家实验室合作定值。该 均匀性和稳定性良好，基于PCA培养基的标准值为(7.1±1.1)×103 CFU/g，基于VRBA培养基的标准值为(6.1±1.0)×103 CFU/g。

GB 4789.28—2013及相关标准中，大肠杆菌标准菌株可以用于非选择性分离和计数固体培养基（TSA、PCA、营养琼脂）以及选择性分离和计数固体培养基（VRBA、VRBA-MUG、麦康凯琼脂、伊红美蓝琼脂）的生长率评价。本研究仅选取了一种非选择性培养基PCA和一种选择性培养基VRBA作为切入点，进行大肠杆菌 的研制。研制的 可以同时用于PCA培养基和VRBA培养基的生长率评价，具有方便快捷的优点。在今后的工作中，项目组将逐步拓展该 适用的培养基范围，从而提高微生物研究机构、检测机构以及培养基生产厂家的质量控制效率。

声明：本文所用图片、文字来源《中国测试》2020年10月，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除

相关链接：大肠杆菌 ，培养基，检验，微生物