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等度洗脱和梯度洗脱的优缺点

纷繁-会员头像-m.cellulartx.com伟业计量
纷繁 2019-04-15 21:20 评论( 2 ) 浏览( 9417 )

液相色谱分离条件中,最重要的参数就是洗脱条件,又可分为等度洗脱梯度洗脱

等度洗脱:是指在样品组分的分析周期中,流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。

梯度洗脱:是指在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比的洗脱方式。

等度洗脱优缺点:

优点

· 对于等度洗脱而言,由于方法运行时,流动相的比例不发生变化,所以它对仪器的要求不高,只需要一个单元泵就可以运行方法。

· 其次,由于等度洗脱条件单一,所以比较容易用来摸索方法设置,例如改变流动相比例,改变柱温等条件。

· 并且由于等度洗脱每次运行时的流动相比例相同,所以相同方法运行多个样品时,样品之间不需要设置平衡时间来让系统恢复到所需的流动相比例。

缺点

· 但是它也有缺点,那就是越往后出峰的组分色谱峰越宽

· 并且大多数等度洗脱的方法分析时间较长

梯度洗脱优缺点:

优点

· 而梯度洗脱能够规避掉等度洗脱的问题,例如梯度洗脱的样品峰,无论先出峰还是后出峰的组分,它们的峰形基本都能保证尖锐对称

· 其次由于梯度洗脱通常设置的流动相比例是让洗脱强度越来越强,这样能保证在较短的时间内,让样品中强保留组分也能被洗脱出来。

缺点

· 但是伴随着这些优点也会有对应的缺点,首先它对仪器的配置要求较高,通常需要配置四元泵或者二元泵。

· 其次它在每次运行样品之间,需要设置一定的平衡时间,来让系统中流动相的比例到达初始流动相比例。

· 最后,由于它的方法设置复杂,例如影响分离的有初始流动相比例、流动相的梯度变化、结束流动相比例、柱温箱温度等,所以方法的开发和优化会较为复杂


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  • 目前用过几款国产的离子色谱,都只有一个泵,常见的离子色谱方法是不是都是等度洗脱?
    Baidu
    2019-04-16 09:21:06
    0 回复(1) 收起
  • 梯度这个对仪器配置、泵的精度要求还是相当高的。
    Baidu
    2019-04-16 08:19:32
    0 回复(0) 收起

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