稻田土壤及水中多抗霉素残留量的 分析与检测方法研究

       摘 要: 采用高效液相色谱法建立了稻田土壤及水中多抗霉素残留量的分析方法。水样品经氨水调节 pH 值 至 8. 0，以乙酸乙酯萃取去除有机杂质，水相经浓缩后定容; 土壤样品用碱性甲醇和水的混合溶液( 70 ∶ 30) 提取，提取液经浓缩后定容。上述萃取液采用 C18亲水性不锈钢色谱柱( AQ-C18，4. 6 mm × 250 mm，5 μm) 进 行液相色谱分离，紫外检测器检测，外标法定量，流动相为水( 用冰乙酸调节 pH 值为4. 0) － 甲醇( 87 ∶ 13) ， 流速: 0 ～ 8 min 为 1. 0 mL/min，8 ～ 16 min 为 0. 3 mL/min，柱温 30 ℃，检测波长 272 nm。结果表明，多抗霉 素的浓度在 0. 05 ～ 2. 00 mg /L 范围内与其对应的峰面积呈良好的线性关系，相关系数( r 2 ) 为 0. 998 8; 多抗霉 素的最小检出量为 1. 00 × 10 － 9 g，在稻田水中的最低检出浓度为 0. 05 mg /L，在稻田土壤中的最低检出浓度 为 0. 05 mg /kg; 在 0. 06、0. 60、1. 00 mg /kg 加标水平下，多抗霉素在稻田水中的平均加标回收率为 97% ～ 99% ，相对标准偏差为 0. 71% ～ 2. 4% ; 在稻田土壤中的平均加标回收率为 95% ～ 97% ，相对标准偏差为 1. 7%～ 4. 5% 。该方法操作简便，分离效果好，准确度和精密度良好，符合农药残留的检测要求。

关键词: 多抗霉素; 稻田土壤; 稻田水; 高效液相色谱; 残留分析

      多抗霉素是一种广谱性抗生素类杀菌剂，英文通用名称为 Polyoxin，日本称为多氧霉素，系可可链 霉菌阿苏变种( Stroptomyces cacaoi var． asoensis) 所产生的代谢物，是肽嘧啶核苷类抗生素。我国生产的 多抗霉素是含有 A ～ N 等 14 种异构体的混合物，多抗霉素原药纯度为 84% ，主要成分是多抗霉素 A 和 多抗霉素 B，其中多抗霉素 B 含量为 22% ～ 25% 。目前在我国农药市场的多抗霉素制剂剂型主要有 1. 5% 、2% 、3% 、10% 的可湿性粉剂及 1% 和 3% 的水剂［1 － 4］。主要用于防治水稻纹枯病、苹果斑点 落叶病、烟草赤星病、梨黑斑病、葡萄灰霉病以及其它经济作物的白粉病、霜霉病等［5 － 10］。

       随着多抗霉素在多种作物病害防治上的广泛应用，由农药残留引起的环境和食品安全等问题日益 受到关注，因此研究多抗霉素在稻田土壤和水中的残留检测方法具有十分重要的现实意义。我国、 CAC( 国际食品法典委员会) 、美国及欧盟等都暂未制定多抗霉素在大米中的 MRL 值，日本制定的多氧 霉素在大米( 糙米) 中的最高残留限量值( MRL) 为 0. 06 mg /kg ［11］。目前，国内外有关多抗霉素的研究 主要集中在病害防治方面，关于其在环境介质和各种作物中的残留检测方法报道较少，仅有少量报道 多抗霉素 B 的检测方法。所报道方法主要有微生物测定法［12］、液相色谱法［13 － 14］和毛细管电泳 － 电致 化学发光法［15］。陈延钟［12］采用牛津杯抑菌圈法，以烟草赤星病菌为测定菌的 “赤星效价”来反映多 抗霉素的生物活性; 于福利等［13］使用 C18反相色谱柱和二极管阵列检测器，以甲醇 － 水( 10 ∶ 90，用磷 酸调 pH 值为 4. 0) 为流动相，采用高效液相色谱法检测多抗霉素 B; 孙忠松等［14］采用氰基柱和二极管 阵列检测器，以乙酸铵缓冲溶液( pH 4. 0) 为流动相，采用液相色谱法检测多氧霉素 B; 李玉杰等［15］以 稀土铕离子( Ⅲ) 掺杂的类普鲁士蓝膜( Eu － PB) 修饰铂电极为工作电极，采用毛细管电泳 － 电致化学 发光法( CE － ECL) 对土壤中的多抗霉素 B 进行检测。这些方法操作简便，但微生物法耗时长，精度 差; 液相色谱法主要集中在对多抗霉素 B 的检测; 毛细管电泳 － 电致化学发光法只对土壤中的多抗霉 素 B 进行检测。尚未见采用液相色谱法测定多抗霉素 14 种异构体总和残留量的报道。目前，高效液相 色谱凭借其高灵敏度和高精度的优势已成为分析环境介质中农药残留量的首选方法。本文建立了高效 液相色谱测定稻田土壤及水中多抗霉素 14 种异构体总残留量的分析方法，该方法具有操作简便、定量 准确等优点，易于推广，可为多抗霉素在食品和其他作物中的残留分析以及有关环境行为的研究提供 技术支撑。