棉籽饼粗蛋白质含量高，常用来作为喂养禽畜的饲料，是喂养牛常用的植物性蛋白质饲料之一。由于棉籽饼中含有有毒的棉酚，用它喂养过的牛，其肌肉组织中通常会有一定的棉酚残留，因此，对牛肉中棉酚残留量进行测定在畜牧养殖业的食品安全方面有着重大的现实意义。棉酚有结合棉酚和游离棉酚2种形式，前者没有化学活性，几乎不被动物消化吸收，所以棉酚残留量的测定基本上以后者为主。

动物组织中游离棉酚的测定方法主要是紫外分光光度法和高效液相色谱法，后者比前者具有更高的灵敏度和准确度，是主要的检测方法，本研究采用二极管阵列检测器建立了高效液相色谱法，用于测定牛肉中游离棉酚的残留量。

1实验设计

1.1仪器设备

LC-10A液相色谱仪（岛津制作所试验计测事业部），配备二极管阵列检测器、C18色谱柱；样品破碎机；超声波清洗机；旋转蒸发仪；高速离心机（配50mL离心管）。

1.2试剂和样品

磷酸（色谱纯）：吸取6mL磷酸溶于300mL水中，混匀；甲醇（色谱纯）、丙酮（色谱纯）；外购棉酚标准溶液（50μg·mL-1），用丙酮稀释成浓度为0.01～20μg·mL-1的系列标准溶液；蒸馏水（重蒸水）；市售新鲜牛肉。上述试剂溶液上机测定前均需经0.45μm滤膜过滤。

1.3色谱条件

色谱柱：C18色谱柱；流动相：甲醇-2%磷酸（体积比为85∶15）；流速：1.0mL·min-1；柱温：常温；测定波长：235nm；进样体积：10μL。

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