研究产α-L-鼠李糖苷酶细菌Bacillusvelezensis的筛选及酶学性质（三）

2.2菌株DTC03产α-L-鼠李糖苷酶酶学性质研究

2.2.1α-L-鼠李糖苷酶的最适温度及热稳定性

如图4所示，菌株DTC03产α-L-鼠李糖苷酶在20～40℃温度下，随着温度上升，相对酶活力呈上升趋势。40～70℃下，相对酶活力随着温度的上升呈下降趋势，且温度处于50～70℃时，随温度的升高，酶活力迅速下降。温度在40℃时相对酶活力最高。同一种酶来源不同，环境不一，其酶学性质也有所差异。目前研究表明，α-L-鼠李糖苷酶的最适温度多在40℃至65℃之间。

菌株DTC03产α-L-鼠李糖苷酶的热稳定性结果见图5。随着环境温度的升高，保温1h后酶的相对酶活降低。20～40℃相对酶活下降较慢。40～60℃相对酶活下降显著。温度达到70℃时酶活降为零。在50℃温度范围内保温持1h后，仍有50%以上的相对酶活。

2.2.2α-L-鼠李糖苷酶的最适pH及pH稳定性

菌株DTC03产α-L-鼠李糖苷酶的最适pH结果见图6。当缓冲液pH为4.0时，相对酶活力低于20%。当缓冲液pH从4.0提高到7.0时，相对酶活力呈上升趋势。当缓冲液pH从7.0提高到9.0时，相对酶活力呈下降趋势。当pH为7.0时，相对酶活最高。目前报道的微生物a-L-鼠李糖苷酶最适pH在4.0～7.0之间。

菌株DTC03产α-L-鼠李糖苷酶的pH稳定性测定结果见图7。酶液在pH4.0缓冲液中静置12h后酶的相对酶活低于20%，在pH9.0的缓冲液中静置12h后酶的相对酶活低于30%。酶液在pH6.0～8.0缓冲液中静置12h后仍有60%以上的相对酶活，在pH7.0的中性缓冲液中相对酶活最高。

2.2.3金属离子对α-L-鼠李糖苷酶活性的影响

金属离子对菌株DTC03产α-L-鼠李糖苷酶的影响测定结果见图8。Al³⁺和Ba²⁺对酶活有显著激活作用。Cu²⁺、N²⁺、Cd²⁺对酶有抑制作用。

3.结论

从高公岛海域泥样中筛选获得了一株产α-L-鼠李糖苷酶的菌株DTC03，经鉴定该菌株为细菌Bacillusvelezensis，目前尚无Bacilusvelezensis产α-L-鼠李糖苷酶的报道。该菌株α-L-鼠李糖苷酶最适温度为40℃，在低温条件下有较好的热稳定性。最适pH为7.0，在pH6.0～8.0区间内酶活性稳定。Al³⁺和Ba²⁺对酶活有显著激活作用。Cu²⁺、Ni²⁺、Cd²⁺对酶有抑制作用。BacillusvelezensisDTC03α-L-鼠李糖苷酶有较好的工业应用潜力。

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