反式－4－羟基－L－脯氨酸(trans－4－hydroxy－Lproline，Hyp)，简称羟脯氨酸，是一种稀有亚氨基酸，在医药保健、材料化工、食品营养和护肤美容等行业都具有广泛的应用。值得关注的是，Hyp是胶原蛋白的组成成分，也是肝和胆囊的构成成分，具有多种生理功能和生物活性，对维持动物正常生理代谢、提高体内营养物质利用效率起着重要作用。

目前，Hyp的生产方法有三种，即生物组织提取法、化学合成法和微生物合成法。生物组织提取法是利用动植物组织作为原料，通过系列化学方法回收得到Hyp。目前，该方法是国内生产Hyp的主要方法，但存在生产和纯化步骤多、杂酸含量高、产率低、成本高、环境污染大、废水废渣难处理等诸多问题。化学合成法多以(S)－苄氧甲基环氧乙烷为原料，通过系列化学反应，最终生成Hyp。

该方法存在原材料成本高，生产过程中会使用有毒性物质等问题，实际生产已经弃用。微生物合成法即微生物发酵法，是通过微生物细胞发酵表达反式－4－脯氨酸羟化酶(trans－4－prolinehydroxylase)，将游离的L－脯氨酸(L(－)－proline，)转化为Hyp的生产方法。与前两种方法相比，微生物发酵法具有反应所需能耗低、专一性极强、无副产物、原材料来源广泛、不使用或很少使用有毒物质、环境污染小等优点。

采用生物组织提取法生产Hyp的方法已经不符合我国日益严峻的环保形式，而且有限的动植物资源也严重制约了本行业的发展。化学合成法工艺复杂，成本较高，且环境污染严重。因此，采用微生物发酵法生产Hyp将成为未来发展的必然趋势。但是，国内有关Hyp的微生物发酵法研究起步较晚，仅见盛花开、袁春伟、刘合栋等关于基因工程菌株构建、初级发酵条件优化的研究，鲜见工业化生产目的菌株筛选相关报道。鉴于此，实验以工业化生产应用为目的，对引进的8株产Hyp菌株的生长特性、发酵效率进行比较分析，以期筛选出优良菌株，为实现Hyp微生物发酵工业化生产奠定一定基础。

1材料与方法

1．1材料

出发菌株为8株含有重组质粒的产Hyp大肠杆菌，由宁夏泰瑞制药股份有限公司技术中心引进保存。胰蛋白胨、酵母提取物购自Oxoid公司，琼脂粉购自Sigma公司，其他试剂均为国产分析纯。

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