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浅谈基于GICT技术快速筛查水产品中氟苯尼考残留

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大C 0 556 2021-12-21
【摘要】[目的]应用现代检测技术,对水产品中药物残留实施监控,推动水产品市场准入制度和基地准出制度的实施。[方法]运用胶体金免疫层析法(GICT)对采集的水产样品中可能残留的违禁药物氟苯尼考进行快速筛查。[结果]此方法氟苯尼考检测限能达到≤50μg/kg,能满足水产品质量安全监管需要,大大减少了基层对水产品安全检测的盲区。[结论]GICT是一种新型快速免疫检测技术,具有特异性强、操作简便快捷、检测成本低等优点,可为水产品中的违禁药物残留监控提供技术支持。
  • 氟苯尼考又称氟代甲砜霉素,是与氯霉素活性相似的广谱抗生素,对绝大多数革兰氏阴性和阳性水产病原菌呈高度抗菌活性,具有高效、吸收快等特点,自面市以来得到广泛应用。尤其是在氯霉素、硝基呋喃类抗生素被禁用后,氟苯尼考在水产品养殖中得到更加广泛的使用。相对于氯霉素和甲砜霉素而言,氟苯尼考的毒性低、环境污染小、不易引起动物再生障碍性贫血,也不会致畸、致癌和致突变,但具有一定的免疫毒性和胚胎毒性。此外,氟苯尼考的使用也会使得水体中抗生素累积,破坏生态环境,对水产品质量安全造成影响。

    20世纪90年代,在现代单克隆抗体技术和新材料技术基础上发展起来的新型检测技术———胶体金免疫层析技术(colloidalgoldimmunochromatographicstripassay,GICT),其原理是以硝酸纤维素膜为载体,利用微孔膜的毛细管作用,滴加在膜条一端的液体慢慢向另一端渗移,通过抗原抗体结合,并利用胶体金呈现颜色反应,检测抗原/抗体,此技术具有特异性强、操作简便快捷、检测成本低、无需特殊仪器设备等优点,特别适用于广大基层检验人员的现场检测需要,已在医学检验、毒品监控、食品安全等领域得到广泛应用。

    目前,国内外的一些生物科技公司研发出水产品药物残留检测的胶体金快速检测试剂条或试剂盒,为胶体金免疫层析技术应用于水产品药物残留提供条件。为强化水产品质量安全监管,加大监测的范围和频率,自2013年5月起,合肥市在全省率先启动水产品质量安全快速检测工作,利用胶体金免疫层析技术对水产品中药物残留实施监控,有力推动安徽省水产品市场准入制度和基地准出制度的实施。笔者利用胶体金快速检测试剂条,对采集的水产品组织中氟苯尼考残留进行快速检测,以期为水产品中的违禁药物残留监控提供技术支持。

    1材料与方法

    1.1材料

    1.1.1试材

    检测样品来源于水产品市场或养殖基地,将抽取的样品带回实验室,取每份样品的可食部分约100g,用组织捣碎机充分绞碎混匀,装入样品袋,标明标识,冷冻保存,备用。

    1.1.2试剂

    所用试剂均为分析纯,水为符合GB/T6682规定的二级水。氟苯尼考抗原和抗体均来自杭州南开日新生物技术有限公司实验室。浓盐酸(HCl)纯度>37%、磷酸氢二钠(Na2HPO4)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、乙酸乙酯(C4H8O2)、正己烷(C6H14)、甲醇(CH4O)、吐温-20(C58H114O26)。

    1.1.3设备

    电子天平,感量0.01g;均质机,转速≥8000r/min;离心机,转速≥4000r/min;氮气吹干仪或空气吹干仪,加热温度≥60℃;移液枪,1~10、10~100、100~1000μL;氟苯尼考胶体金免疫层析快速检测试剂板组成(图1)。

     


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