（4）测定步骤

称取通过0.149mm尼龙筛混匀土样0.1000g于铂坩埚或聚四氟乙烯坩埚中，用二次去离子水(或亚沸水)润湿土壤。然后加入7mL HF,1mL HNO₃及 1mL H₃PO₄，在电热板上加热分解样品，蒸至粘稠状。取下坩埚，冷却后再加入5mL HF及2mL HCIO₄(消点液加入量，视样品分解难易而酌情掌握)。继续蒸至粘稠状。取下坩埚，加入2mL二次去离子水，加热溶解残渣至溶液清亮。取下坩埚，冷却后，转移到25mL容量瓶中定容。摇匀后立即倒入聚乙烯小瓶中备用。用制备好的高、低标准溶液，建立ACT(分析样品用的软件程序)进行仪器标准化，然后将待测液直接用ICP-AES法侧定B。经微机收集处理分析数据，由打印机打印出B元素的分析结果。

（5）注意事项

①鉴于市售的磷酸纯度不够理想，所以在操作过程中，空白与试样中加入的磷酸量要严格控制一致，以减少误差。

②用于消煮土壤的各种酸的用量，视土壤而异，畜含铁、铝的红集及砖红壤，需多加HF，并增加消煮次数。

3、有效硼的测定

（一）沸水浸提-甲亚胺比色法

（1）方法原理

土样经沸水浸提5min,浸出液中的硼用甲亚胺比色法测定。甲亚胺比色法测硼是在弱酸性水溶液中生成黄色配合物(测定浓度范围在。mg·L^-1～10mg·L^-1内符合朗伯-比尔定律)，一般在显色lh后比色，显色稳定时间长达3h。此法不受硝酸盐干扰;铁、铝等金属离子的干扰可加EDTA和氮基三乙酸配合掩蔽。甲亚胺试剂可用H酸和水杨醛合成，亦可直接加入溶液进行测定。方法简便，结果稳定，检出限为0.02mg·L^-1，并能适用于自动化分析。

2、仪器及设备

分光光度计；塑料小烧杯。有10mL刻度的试管;石英(或其他无硼玻璃)锥形瓶及小冷凝管。

3、试剂

①甲亚胺溶液:称取0.9g甲亚胺(C₁₇H₁₅O₉S₂N )和2g抗坏血酸(C₆H₈0₆分析纯)，加100mL去离子水，微热溶解(分析时当天配用)。若无固体甲亚胺试剂，可分别配制H酸溶液及水杨醛溶液使用。

②H酸溶液:在室温下溶解1g 1-氨基-8蔡酚-3,6-二磺酸氢钠［C₁₀H₄NH₂OH(S0₃HNa )₂］于100mL去离子水中。然后加入2g抗坏血酸，使之完全溶解。若混浊可过建后使用。溶液pH值2.5，此液要当天配制。

③水杨醛溶液:每100mL80%乙醇中加入水杨醛(C₆H₄OH·CHO)0.04 mL。

④氯化钙溶液[c(CaCl₂)=0.5 mol·L^-1]:5.55g无水氯化钙(CaCl₂分析纯)，加水溶解稀释至100mL。

⑤缓冲液:取乙酸铵(CH₃0OONH₄，分析纯)231g溶于水中，稀释到1L，再加入67gEDTA二钠盐，此液pH 6.7。

⑥翻标准溶液:将0.5716g干燥的硼酸(H₃BO₃优级纯)溶于水中，定容至1L，此液为100mg·L^-1硼标准贮存液。将此硼标准贮存液稀释10倍，即为10 mg·L^-1硼标准溶液。吸取10mg·L^-1硼标准溶液1mL、2mL、3mL、4mL、5mL，定容成5mL，配成浓度为0.2mg·L^-1、0.4 mg·L^-1、0.6 mg·L^-1、0.8 mg·L^-1、1.0 mg·L^-1、的一组硼标准溶液系列，贮存在塑料瓶中备用。

4、测定步骤

待测溶液的制备取20.00g通过2.0mm尼龙筛的风干土样于250mL石英或无硼玻瑞锥形瓶中，按土水比1:2，加40mL去离子水，连接冷凝管，文火煮沸5min(从沸腾时计算，用秒表计时)，取下，立即冷却。煮沸过的土壤溶液中，加入4滴氯化钙溶液(试荆④)，移入离心管中，离心5min～10min(4000r· min^-1)，并过滤(用紧密滤纸过滤)，滤液承接于塑料瓶中，供测硼用(最初滤液混浊时可弃去不要)。

测定 取1mLH酸溶液(试剂②)于10mL干净试管中，加2mL水杨醛溶液，摇匀。再加入3mL缓冲液，立即加4mL待测液，摇匀后放置1h，用分光光度计在420nm～430nm波长处比色，用试剂空白溶液调吸收值到零，测显色液的吸收值。

工作曲线的绘制取标准系列溶液0.2mg·L^-1、0.4mg·L^-1、0.6mg·L^-1、0.8mg·L^-1、1.0 mg·L^-1、硼(B)各4mL于不同试管中，按上述步骤显色并侧试吸收值。以吸收值为纵坐标，以标准系列溶液含量为横坐标，绘制工作曲线。

5、结果计算

式中: ω(B)——土壤有效硼质量分数.mg·kg^-1;

P——从工作曲线查得硼的浓度，mg·L^-1;

V——吸取浸出液体积,mL;

ts——分取倍数；

m——土样质量,g。

（二）沸水漫提一ICP-AES法侧定

1、方法原理

土壤经沸水浸提5min,浸出液中的硼，直接用ICP-AES法侧定。

2、试剂

硼标准溶液:配制10mg· L^-1硼的标准液为仪器标准化的高标。二次去离子水为低标。

3、仪器及设备

①石英锥形瓶;②石英冷凝管；③ICP发射光谱仪。

（三）沸水浸提一姜黄素比色法

1、方法原理

土样经沸水浸提5min,浸出液中的硼用姜黄素比色法侧定。

姜黄素是从生姜中提取的黄色色素，不溶于水，但能溶于甲醇、乙醇、丙酮和冰乙酸，呈黄色。在酸性介质中与硼结合成玫瑰红色的配合物，即玫瑰花青苷。在550nm波长处比色测定。玫瑰花青苷溶液在0.0014mg·L^-1～0.06mg·L^-1的浓度范围内符合比耳定律。溶于酒精后，在室温下可稳定1h～2h。

参考资料：土壤农业化学分析方法